Home > Publications database > Funktion von zyklischen Nukleotiden und zyklisch Nukleotid-gesteuerten Ionenkanälen im visuellen und olfaktorischen System von Drosophila melanogaster |
Dissertation / PhD Thesis/Book | PreJuSER-26441 |
2002
Forschungszentrum Jülich GmbH Zentralbibliothek, Verlag
Jülich
Please use a persistent id in citations: http://hdl.handle.net/2128/2562
Report No.: Juel-3997
Abstract: Die funktionelle Bedeutung von zyklisch Nukleotid-gesteuerten lonenkanälen (CNGKanäle) beim Seh- und Riechvorgang der Wirbeltiere ist intensiv untersucht und gut verstanden . Für die Fruchtfliege Drosophila melanogaster war dagegen bisher unklar, wieviele CNG-Kanalgene im Genom vorhanden sind, in welchem Gewebe CNG-Kanäle exprimiert werden und welche Funktion sie besitzen. In dieser Arbeit wurden zum ersten Mal durch Datenbankanalysen vier Gene identifiziert, die für CNG-Kanaluntereinheiten bei Drosophila kodieren . Ein Gen (Dmcngb) wurde aus einer cDNA-Bibliothek isoliert . Es kodiert vermutlich für eine ß- Untereinheit eines CNG-Kanals. Das Dmcngb-, Dmcnga- und Dmcng3-Gen wurde mit einem Expressions-Tag versehen. Sowohl DmCNGA- als auch DmCNGBProteine werden in HEK293-Zellen exprimiert . Das DmCNG3-Protein war nicht nachweisbar. Mit immunzytochemischen Färbungen kotransfizierter HEK-TSA-Zellen wurden die DmCNGA- und DmCNGB-Proteine in einigen Zellen kolokalisiert . Die elektrischen Eigenschaften der CNG-Kanäle aus Dmcnga/Dmcngb kotransfizierten Zellen unterscheiden sich nicht von CNG-Kanälen aus Zellen, die nur mit dem Dmcnga-Gen transfiziert wurden. In dieser Arbeit wurden spezifische Antikörper gegen die DmCNGAKanaluntereinheit hergestellt und charakterisiert. Immunhistochemische Färbungen von Gewebeschnitten adulter Fliegenköpfe zeigten, dass das Protein in der Retina exprimiert wird . Homooligomere DmCNGA-Kanäle werden - 50 Mal besser durch cGMP als durch cAMP geöffnet . In der Retina wird eine lösliche Guanylatzyklase exprimiert . Erstmals konnte in der vorliegenden Arbeit mit zwei unabhängigen Methoden gezeigt werden, dass auch eine Stickoxid-Synthase (NOS) in der Fliegenretina exprimiert wird . Die NOS synthetisiert den gasförmigen Botenstoff NO, der für die Aktivierung der löslichen Guanylatzyklase benötigt wird. Damit ist in der Retina die Enzymausstattung vorhanden, um einen cGMP-abhängigen Signalweg zu regulieren . Welche Aufgabe CNG-Kanäle in diesem Signalweg haben, muss durch weitere Untersuchungen geklärt werden .
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